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bca法測蛋白濃度原理、實驗步驟及注意事項
2024-08-15 蛋白質(zhì)濃度測定是用于計算純化方法的回收率的重要方法。常用的測定方法包括雙縮脲法、Lowry法、紫外吸收法、BCA蛋白濃度檢測法等。其中常用的方法就是BCA法。BCA全稱是BicinchoninicAcidAssay，也叫SmithAssay，這個方法是由PaulK.Smith發(fā)明的。這個方法通過展示不同濃度樣品的顏色變化來判斷蛋白的濃度。檢測原理BCA是一種堿性的水溶性復合物，性質(zhì)穩(wěn)定。在其提供的堿性環(huán)境下，蛋白質(zhì)可以將BCA試劑中的Cu2+還原為Cu+，Cu+繼而與BCA試...
DNA電泳套裝：揭開基因的奧秘
2024-08-15 在現(xiàn)代生物技術(shù)領(lǐng)域，DNA電泳技術(shù)已成為一種實驗手段。它廣泛應用于基因克隆、基因突變檢測、DNA序列分析等領(lǐng)域。而DNA電泳套裝則是進行這項實驗的工具。本文將為您詳細介紹DNA電泳套裝的組成、原理及其在生物科研中的應用。一、DNA電泳套裝的組成DNA電泳套裝主要包括以下幾部分：電泳儀：用于提供穩(wěn)定的直流電源，使DNA分子在電場作用下發(fā)生遷移。電泳槽：一般為矩形或梳子形狀，用于裝載電泳凝膠。電泳凝膠：由聚丙烯酰胺或瓊脂糖等物質(zhì)制成，是DNA分子遷移的載體。凝膠制備試劑：包括凝膠...
黑膠蟲污染怎么解決（黑膠蟲清除劑）
2024-08-09 黑膠蟲是一種生物還是非生物，學術(shù)界至今還有爭議，這里暫且將其認作是一種微生物。黑膠蟲往往來源于血清，是一種常見的細胞污染物，與細胞共生，隨細胞傳代而傳代，通?？股貙ζ錈o效。黑膠蟲與細胞競爭性生長，對細胞生長不利，嚴重時導致細胞死亡。目前很多細胞存在被黑膠蟲污染的現(xiàn)象，對細胞培養(yǎng)及其后續(xù)實驗造成了極大地影響。黑膠蟲特征?培養(yǎng)基和正常培養(yǎng)基沒有區(qū)別；?低倍鏡下是黑色的點點和細胞碎片沒有區(qū)別；?高倍鏡下可以觀察到點狀片狀的游動小體，能模仿細胞碎片和細胞分泌物做布朗運動；?與細胞的...
活性氧ROS檢測原理及檢測步驟
2024-08-09 ROS也叫活性氧（reactiveoxygenspecies）是細胞內(nèi)產(chǎn)生的一種具有氧化活性的化學物質(zhì)，包括過氧化氫、超氧陰離子等。ROS在正常生理條件下也會產(chǎn)生，但當其產(chǎn)生過多或清除不足時，會對細胞造成氧化應激，導致細胞損傷和疾病發(fā)生。檢測原理用于檢測細胞內(nèi)ROS廣泛采用的方法是DCFH-DA熒光探針法。DCFH-DA（二氯熒光黃雙乙酸鹽）是一種可指示的探針，其本身不具有熒光，但可以自由穿過細胞膜。一旦進入細胞，它會被細胞內(nèi)的酯酶水解成DCFH。由于DCFH無法穿過細胞膜，...
原代細胞凍存液在生命科學中的應用與展望
2024-07-31 在生命科學研究的浩瀚海洋中，細胞作為最基本的生命單位，承載著無數(shù)科學家的探索與希望。而原代細胞，直接來源于生物體的組織，因其保持了最原始的生理特性和基因表達，成為了科研領(lǐng)域中一顆璀璨的明珠。然而，原代細胞的培養(yǎng)和保存卻是一項具有挑戰(zhàn)性的任務。在這一過程中，原代細胞凍存液扮演了至關(guān)重要的角色，如同時間膠囊一般，為科學家們提供了保存和復蘇細胞的可能，極大地拓展了生命科學研究的邊界。細胞凍存，是一種將細胞置于低溫（通常為液氮溫度，即-196°C）下保存的技術(shù)，其核心在于利用凍存液中...
無血清細胞凍存液的原理、制備與應用
2024-07-23 一、原理無血清細胞凍存液是一種重要的生物樣品保存方法，它通過將細胞在低溫下凍結(jié)保存，以延長細胞的存活時間和保持其功能。其原理主要基于細胞在低溫下的生物學性質(zhì)：低溫效應：當細胞暴露在極低溫度下時，細胞內(nèi)的代謝過程會減緩甚至停止，從而使細胞活力降低，停止增殖并減少細胞死亡。此外，低溫還可以減少細胞內(nèi)的化學反應速率，從而減緩細胞的老化和退化。保護劑作用：通過添加適當?shù)谋Ｗo劑，如冷凍保護劑，可以進一步減少細胞在冷凍過程中的損傷。這些保護劑能夠穿透細胞，避免細胞內(nèi)部水分子形成冰晶而損傷...
生命的源泉：胎牛血清的科學與應用
2024-07-15 在生物醫(yī)學的廣闊天地中，有一種神秘而珍貴的液體，它承載著生命的奧秘，滋養(yǎng)著細胞的成長，它就是胎牛血清（FetalBovineSerum,FBS）。胎牛血清，這個名字聽起來似乎帶著一絲神秘色彩，但它卻是現(xiàn)代生物技術(shù)領(lǐng)域的重要組成部分。一、胎牛血清的來源與特性胎牛血清是從懷孕母牛的子宮中提取出的未出生小牛的血液，經(jīng)過一系列復雜的分離和純化過程得到的上清液。這種血清含有豐富的蛋白質(zhì)、生長因子、激素、脂質(zhì)以及各種微量元素等，它們?yōu)榧毎峁┝艘粋€接近生理狀態(tài)的生長環(huán)境。胎牛血清的這些特...
預染蛋白Marker：便捷高效的蛋白質(zhì)分離與鑒定工具
2024-07-11 預染蛋白Marker，全稱預制蛋白質(zhì)分子量標記，是一種用于蛋白質(zhì)電泳分離和蛋白質(zhì)分子量測定的生物化學試劑。它通過將已知分子量的蛋白質(zhì)預先染色，形成一系列不同分子量的標準條帶，為實驗者提供了一種便捷、高效的蛋白質(zhì)分離與鑒定工具。一、預染蛋白Marker的工作原理預染蛋白Marker中的蛋白質(zhì)已經(jīng)過純化和鑒定，然后通過特定的染色劑進行染色。這些染色劑與蛋白質(zhì)結(jié)合后，可以在蛋白質(zhì)電泳過程中顯現(xiàn)出不同的顏色或熒光。在電泳分離過程中，預染蛋白Marker與待測樣品一起進行電泳，根據(jù)Ma...

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