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技術文章
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蛋白保存方法，你知道多少
2022-05-24
生物大分子的貯藏保存可分為干態(tài)和液態(tài)貯藏兩種。蛋白質失活受多種理化因素的影響，主要有空氣、溫度、水分、光線、酸堿度、樣品狀態(tài)、微生物活動、保存時間和容器等。這些因素可單獨起作用，但更多情況是協(xié)同作用?？偟膩碚f，蛋白質的保存主要考慮其構型穩(wěn)定、活性中心的保護、避免輔助因子喪失等，以防止其變性、解聚或降解。由于溫度和水分對蛋白質的穩(wěn)定性影響很大，故蛋白質最好是低溫、冷凍或冷凍干燥后低溫干燥保存。1.液態(tài)保存(1).在低溫下保存蛋白質對熱敏感，溫度越高，穩(wěn)定性越差。因此，低溫保存蛋...
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牛血清白蛋白BSA在生化實驗中有廣泛的應用
2022-04-26
牛血清白蛋白（BovineSerumAlbumin,BSA）是牛血清中的一種球蛋白，又稱第五組分（需要注意的是，第五組分并不是BSA的一種組份，而是EdwinJ.Cohn教授早期從血液中通過特定的分離技術得到5種組份，其中第五種就是白蛋白），CAS號為9048-46-8，包含583個氨基酸殘基，分子量為66.430kDa，等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用，無免疫球蛋白IgG牛血清白蛋白產品血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用...
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介紹重組腸激酶的使用注意事項
2022-04-24
重組腸激酶（Enterokinase,lightchain）是一種高度專一性識別Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列的蛋白酶，在Lys的C端水解多肽。它可以將胰蛋白酶原轉變?yōu)橐让?，也可以將帶有這個識別序列的融合蛋白切開。由于腸激酶具有高度專一性，水解效率高的特點，它被廣泛地應用于基因工程產品的開發(fā)，其應用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質的特異性斷裂，尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程、生物化學、分子生物學等研究。腸激酶具有高度專一性，水解效率高的特點，它被廣泛地應...
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細胞凍存液分類與選擇
2022-04-24
細胞凍存是細胞生物學研究及藥物研發(fā)細胞實驗中需要經常面對的常規(guī)操作。隨著細胞越來越嬌，人工越來越貴，各種細胞凍存液應運而生，如何從名目繁多的細胞凍存液中選擇變成一個問題。本文從細胞凍存液分類，應用場景，使用效果等多方面加以闡釋，希望能對如何選擇細胞凍存液有所助益。一、細胞凍存液的分類從成分劃分（1）滲透性和非滲透性滲透性保護劑分子量小可滲透到細胞內，如甘油、DMSO、乙二醇等，其在細胞冷凍存*凝固之前，滲入細胞內，降低細胞內外溶液中的電解質濃度，阻止細胞內水分外滲，避免細胞過...
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細胞凍存液原理及配制方法
2022-04-22
細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外，減少細胞內冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損傷。細胞凍存是細胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實驗順利進行的重要技術手段。在細胞建株和建系中，及時凍...
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PEI轉染試劑是非常有潛力的非病毒質粒載體試劑
2022-03-28
分子生物學的發(fā)展使得大量致病基因被鑒定，科學家在這些研究成果的基礎上發(fā)展了基因治療。基因治療是利用基因載體將治療基因導入患者體內，進而表達功能蛋白以達到治療的目的?；蛑委焸鬟fDNA面臨的挑戰(zhàn)之一是外源治療基因會被體液和胞外空間的核酸內切酶降解。治療基因在目標組織中的選擇性積累、細胞內化以及從溶酶體逃逸這些問題對所有核酸治療劑都是需要克服的。DNA必須輸送至細胞核以允許獲得轉錄和表達。因此，設計和制備安全高效的基因載體來壓縮并且保護治療基因以免被核酸內切酶降解并延長其在體內的...
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基因組DNA提取原理說明
2022-03-24
DNA是遺傳信息的載體，是最重要的生物信息分子，是分子生物學研究的主要對象。所以基因組DNA提取實驗是分子生物學最基本實驗之一。今天若重介紹基因組DNA提取的原理。在接下來的時間了還會介紹動物基因組DNA的提取步驟。DNA.RNA和核苷酸都是極性化合物，一般都溶于水，不溶于乙醇、氯仿等有機溶劑，它們的鈉鹽比游離酸易溶于水，RNA鈉鹽在水中溶解度可達40g/L.DNA在水中為10g/L,呈黏性膠體溶液。在酸性溶液中，DNA天然狀態(tài)的DNA是以脫氧核糖核蛋白(DNP)形式存在于細...
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蛋白酶k的作用主要是降解RNA酶
2022-03-21
蛋白酶，顧名思義，降解蛋白的酶，是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵，用于生物樣品中蛋白質的一般降解。在RNA提取中，蛋白酶k的作用主要是降解RNA酶，防止RNA的降解。蛋白酶K廣泛應用于分子生物學，藥理學等科研方面。一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關的絲氨酸蛋白酶，具有很高的比活性。一般儲存在-20°C，避光防潮密閉干燥蛋白酶是所有能夠催化分解蛋白質的酶類的統(tǒng)稱蛋白酶k是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶，從林伯氏白色念球菌中純化得到。該酶...
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